获得目的基因的方法
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发布时间:2022-04-20 04:33
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时间:2023-06-24 11:07
获取目的基因的方法主要有基因组文库法、cDNA的克隆、反转录法、人工合成法等。
从基因文库中获取这个没什么就是现成的基因储存在受体菌上你用的时候提取出来就好了基因组文库法就是原教材中的用*性内切酶直接获取。
cDNA文库法(即原教材中提到的逆转录法)。cDNA文库,是指汇集以某生物成熟mRNA为模板逆转录而成的cDNA序列的重组DNA群体。直接分离基因最常用的方法是“鸟*法”,又叫“散弹射击法”。
人工合成主要是通过DNA自动合成仪,通过固相亚磷酸酰胺法合成,具体过程可以网上查询,反正是可以按照已知序列将核苷酸一个一个连接上去成为核苷酸序列,一般适于分子较小而不易获得的基因。对于大的基因一般是先用化学合成法合成引物,再利用引物获得目的基因。
目的基因简介:
目的基因(geneofinterest),也称靶标基因,是指在实验中研究或操纵的特定基因。比如,转基因研究中转入到生物体内的外源的抗虫基因Bt或抗除草剂基因CP4-EPSPS等。
目的基因可以是生物体本身的,也可以是来自不同生物体的。比如Bt基因来自苏云金芽孢杆菌。
目的基因相关的操作包括目的基因鉴定、分离、克隆、转化及转化后鉴定和测试等。
当产生许多拷贝的目的基因后,可以通过酶切反应(或gataway系统),将目的基因酶促连接到构建载体中,然后将整个构建在细菌中表达,从报告基因选取阳性转化体,通常涉及含有插入DNA的菌落中的一些颜色变化。挑取阳性菌落,做液体培养,提取质粒DNA,进行酶切,切胶纯合。获得的DNA可用于后续的转化。
目的基因的4种获取方法
1、从基因文库中获取目的基因;2、cDNA文库;3、反转录法;4、人工合成法。目的基因,也称靶标基因,是指在实验中研究或操纵的特定基因。在基因克隆过程中目的基因就是要分离、纯化、克隆并转化到生物体的那个可以带来预期表型性状如抗虫或耐除草剂的基因。目的基因获得方法是取得含有所需生物学功能或编码...
获取目的基因的方法有哪些
获取目的基因的方法有哪些如下:1、从基因文库中获取。将含有某种生物的许多DNA片段导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物不同的基因,称为基因文库,根据目的基因的有关信息,如根据基因的核苷酸序列,基因的功能,基因在染色体上的位置等特性来获取目的基因。2、人工合成。根据已知多肽链的氨...
获得特定的目的基因的方法有( ) ①从基因文库中获取目的基
B 解析: 获取目的基因的方法有:从基因文库中获取、利用PCR技术扩增、人工合成目的基因等。
根据mRNA的信息推出获取目的基因的方法是
获得目的基因的方法:①从基因文库中获取 ②利用PCR技术扩增 ③人工合成(化学合成)。根据mRNA的信息推出获取目的基因的方法属于人工合成,即用mRNA,在反转录酶的作用下,通过反转录形成目的基因,所以选C。考点:基因工程 点评:本题难度一般,要求学生识记基因工程的相关知识,考查学生对基因...
基因合成的方法有哪些?
1. 反向转录法:通过提取mRNA,利用反转录酶合成cDNA,进而获得目的基因。2. 从细胞基因组直接分离法:直接从细胞中提取基因组DNA,通过特定的方法分离纯化目的基因。3. 人工化学合成法:通过化学方法合成目的基因的DNA序列,适用于合成已知序列的目的基因。
目的基因的制备方法有哪些
获取目的基因的方法主要有两种:1、从供体细胞的DNA中直接分离基因,最常用的方法是“鸟枪法”又叫“散弹射击法"。2、人工合成基因:以目的基因转录的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,再在酶的作用下合成双链DNA,即目的基因,另一条途径是蛋白质的氨基酸序列,推测出信使RNA序列,再推测出结构...
从生物体克隆目的基因的方法有哪些?
进行基因序列克隆的一种方法。先从基因文库(genebank)中找到有关基因序列,据此合成一对寡聚核苷酸引物,从植物中提取染色体DNA或RNA,进行PCR扩增。扩增的片段纯化后插入合适的质粒载体上,用酶切分析和序列分析检测重组子,并与已知基因序列比较,以获得目的基因。
获得目的基因的方法
化学合成法(主要是序列已知的基因)。主要是通过DNA自动合成仪,通过固相亚磷酸酰胺法合成,具体过程可以网上查询,反正是可以按照已知序列将核苷酸一个一个连接上去成为核苷酸序列,一般适于分子较小而不易获得的基因。对于大的基因一般是先用化学合成法合成引物,再利用引物获得目的基因。2、基因组文库法(就...
目的基因的制备方法有哪些
目的基因的检测和表达:1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交(DNA-DNA)技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出mRNA,方法是采用分子杂交(DNA-RNA)技术。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是采用抗原抗体杂交技术。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定...
如何从基因文库中获取目的基因?
获得目的基因的方法:一、构建基因文库 提取总DNA。用限制性内切酶将总DNA切成小片段,连到质粒或噬菌体载体上,把这些质粒转化到细菌,随着细菌繁殖而复制,这个过程又称为基因克隆(gene clone)将总DNA包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上,便构成了该生物的基因文库(gene library)。二、...