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我做连接,用SwaⅠ酶切,平头末端,用T4连接酶25度反应一小时,总是不成功,能给分析一下原因或有好的方法

发布网友 发布时间:2022-04-29 09:03

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1个回答

热心网友 时间:2023-10-13 18:13

平头连接本来就没有粘性末端连接容易,一般我们永T4连接的话是16度过夜,成功率很高。也可4度冰箱放久点。说明书说25度也是可以的,我们一直没有试过。如果前面的实验都正确的,建议采用16度水浴过夜

热心网友 时间:2023-10-13 18:13

平头连接本来就没有粘性末端连接容易,一般我们永T4连接的话是16度过夜,成功率很高。也可4度冰箱放久点。说明书说25度也是可以的,我们一直没有试过。如果前面的实验都正确的,建议采用16度水浴过夜
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