tmb显色实验最佳时间
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发布时间:2022-04-29 06:16
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时间:2022-06-20 14:04
使用方法用适当的干净容器(用纯净水反复冲洗),倒出适量的单组分TMB显色液,待达到室温后即可使用。
加液:加完HRP结合物并孵育一定时间后,用适当洗涤液洗板3-5次,每孔加TMB显色液100ul。 根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。
终止:加入等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应,孔中反应液由蓝色变为*。
读数:终止反应后30分钟内在450nm处测定吸光值。
注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
背景知识
目前酶免疫分析(EIA)技术,已被广泛应用于抗原,半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶,由于3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)在HRP的显色反应体系中,比其它色原具有更高的灵敏度且无致癌性而被广泛应用。TMB主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。为了满足不同的试剂盒产品研发与生产以及科研需求,本公司专门研制了针对不同类型的基于HRP的免疫分析用TMB显色液
tmb显色实验最佳时间
根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。终止:加入等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。读数:终止反应后30分钟内在450nm处测定吸光值。注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀...
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tmb显色时间多长时间
在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。。TMB显色液是一种采用了最新单一溶液TMB显色技术,通过辣根过氧化物酶(HRP)催化TMB显色,用于ELISA等的显色液。本显色液也可以用于检测血液或血红蛋白等样品中的过氧化物酶含量。
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