我想请教各位前辈一下,做Elisa试验时,OD值偏低时什么原因啊!

发布网友发布时间：2022-04-29 08:18

共2个回答

热心网友时间：2022-06-24 18:45

你最好再详细点，可能的原因
1.标准系列的问题。看标准的浓度有没有提高的潜力。这要看目前你的标准的拟合曲线。
2.显色试剂的问题。TMB显色试剂过期或污染等。
3.酶标抗体的问题。酶标抗体过期、储存条件不当，稀释液不含蛋白质、基质中有影响酶活的物质如某些防腐剂等。
4 样品和标准基质影响。不知你的方法中标准和样品是否是同样的基质？基质中如果有大浓度的蛋白或其他影响抗体抗原结合的物质。
5.孵育条件实验中孵育的条件是不是控制的？室温的话会受环境温度影响。一般都是37度湿盒。
6.洗涤的问题。每次洗板洗几次？每次多长时间？什么方式？次数过多、时间过长、洗版过猛都会造成显色偏低。

热心网友时间：2022-06-24 18:46

◆ 加样存在误差，使得标准品不呈梯度。
◆ 标准品出现降解。应避免标准品反复
冻融，或重新制备并稀释标准品。
◆ 引物或探针不佳。重新设计更好的引
物和探针
◆ 模板中存在抑制物，或模板浓度过高