在转基因中,为什么农杆菌介导的方法容易褐化,而打基因*没有褐化呢 注:我们用的是幼胚。多些指教!
发布网友
发布时间:2022-04-28 23:58
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热心网友
时间:2023-09-25 05:35
菌是有毒性的,毒性越强,越易褐化,且侵染时幼胚完全浸没在菌液当中,与菌的接触相当充分,打个比方,就像夏天食物易腐烂一样。
而基因*是纯物理方法,金弹极小,瞬间打入不会对整体造成太大的伤害。
防止幼胚浸菌后褐化:可以用毒性较低的农杆菌菌株LBA4404,也可缩短共培养时间,或者降低菌液OD值,或者在共培养基中加入*银。
像楼上说加入DTT或半胱氨酸也是可以的,但是酚类物质对于农杆菌来说是一种信号,农杆菌一旦发现这些信号一方面激活基因序列中的毒区,一方面附着在宿主细胞表面。而像小麦玉米水稻等单子叶植物自身不会像双子叶植物如大豆产生酚类物质吸引农杆菌,所以在试验中常加入乙酰丁香酮来充当酚类物质的角色,促进转化。