qpcr扩增效率计算时x轴怎么计算
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发布时间:2022-04-28 22:02
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热心网友
时间:2022-06-23 16:50
Ct= -k lgX0+ b(线性方程)用这个方程可以通过Ct值算出样品的起始浓度 斜率=-1/lg(1+e) 扩增效率E=1, 斜率=-3.32 扩增效率范围:90%-110% 斜率范围:-3.1和-3.59之间 △△Ct这是相对荧光定量的一个计算公式的简化形式,用于比较不同样品之间的差。
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qpcr扩增效率如何计算
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PCR扩增效率的评估
qPCR扩增效率主要是通过标准曲线的线性关系方程Cq=-klgX0+b来判断,扩增效率E在90%-110%之间时,认为扩增接近理想情况;参数R2要求≥0.98,R2越接近1,则说明Cq和X0的Log值之间的相关性越高。那么扩增效率E表现不好,主要分为两种情况:1)过低的扩增效率(<90%)可能存在的原因:☑ 移...
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qPCR效果好不好,这6个要素要知道~
当计算评估PCR扩增效率时,至少需要做3次平行重复,并至少做5个数量级倍数(5logs)连续梯度稀释模板浓度,得到线性方程Cq= -klgX0+b、扩增效率E=10(-1/k)-1。并且E在0.9-1.1之间,即扩增效率在90-110%,被认为此扩增接近理想情况;相关系数R2值大于0.98时,说明两个数值之间相关的可信度很好...
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qpcr标准曲线方程斜率-2.6可以用吗?
不可以,扩增效率100%时斜率是-3.33.扩增效率=【10^-(1/a)】-1。根据这个公式计算出来-2.6的斜率对应的扩增效率是142.45%,一般正常的扩增效率在90%~110%之间。
qpcr标准曲线斜率与扩增效率的关系
扩增效率=(10^(-(1/斜率)))-1 所以当斜率=3.3时,扩增效率为100%。
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搞定qPCR数据分析
Cq值表示扩增产物达到设定阈值所需的循环数,与起始浓度呈线性关系。定量分析时,Cq值范围一般为15-35,过小或过大可能导致不准确。同时,分析扩增效率及相关系数也非常重要。扩增效率在90-110%之间为理想状态,R²值大于0.98表明数据相关性很好。重复性反映了实验结果的一致性,通过标准偏差衡量。