如何测量RNA浓度
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发布时间：2022-05-16 15:27
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热心网友
时间：2023-10-28 06:31
1、超微量分光光度计测260nm吸收值计算。
可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。
2、也可以用RNA胶（凝胶成像）检测。例如：原核生物的核糖体所含的rRNA有5S、16S及23S三种。在胶上就有三条明显大小不一的条带。凝胶迁移分析。可以用来研究RNA-蛋白相互作用。基本原理是：结合了蛋白的RNA在凝胶中的迁移速率更慢，因而可以区分出结合蛋白与未结合蛋白的RNA条带。
扩展资料
1、RNA的功能是：
（1）具有肽酰转移酶的活性。
（2）为tRNA提供结合位点。
（3）在蛋白质合成起始时，参与同mRNA选择性的结合，在肽链的延伸中与mRNA结合。
2、原核生物的rRNA分三类：5SrRNA、16SrRNA和23SrRNA。
真核生物的rRNA分四类：5SrRNA、5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA。
S为大分子物质在超速离心沉降中的一个物理学单位，可间接反映分子量的大小。原核生物和真核生物的核糖体均由大、小两种亚基组成。
3、凝胶成像对DNA或RNA胶 进行切胶、拍照、观察、分析的实验室类仪器，凝胶成像系统可以应用于分子量计算、密度扫描、密度定量、PCR定量等生物工程常规研究。
参考资料来源：百度百科—核糖体RNA
参考资料来源：百度百科—超微量分光光度计
参考资料来源：百度百科—凝胶成像
参考资料来源：百度百科—RNA GEL SHIFT
热心网友
时间：2023-10-28 06:31
1总量：微量分光光度计测260nm吸收值计算。
2纯度：微量分光光度计测260nm/230nm吸收值的比值，用于评估有机溶剂残留；260nm/280nm吸收值的比值，用于评估蛋白质污染比例。
3完整性：以Agilent Bioanalyzer进行毛细管电泳(capillary electrophoresis)，并以软件的RIN(RNA Integrity Number)分数评估，10为RNA完整性最好，0为最差。
RNA质检参数中260、280、320、230nm下的吸光度分别代表了核酸、蛋白质、盐浓度和有机溶剂的值。其中：
A230: 测定其它碳源物质，如酚，糖类等。
A260：核酸的吸收峰测，测RNA，DNA，引物等的浓度用的。
A280：蛋白质的吸收峰。
一般的，我们只看OD260/OD280(Ratio，R)在1.8~2.1范围内时，我们认为 RNA中蛋白的污染是可以容忍的，不过要注意，当用 Tris 作为缓冲液检测吸光度时，R 值可能会大于 2（一般应该是<2.2的）。当R 1.8时，溶液中蛋白的污染比较明显，可以根据自己的需要决定这份RNA 的命运。当R > 2.2时，说明RNA已经水解成单核酸了，而纯RNA的OD260/OD280的比值为2.0。
