干粉引物怎么稀释到工作液

发布网友发布时间：2022-05-15 07:24

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热心网友时间：2023-10-13 12:57

先离心！然后加入适量的水或TE溶解。一般配制成较高浓度的母液（约100μM），保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。引物浓度不宜偏高，浓度过高有两个弊端：一是容易形成引物二聚体（primer-dimer），二是当扩增微量靶序列并且起始材料又比较粗时，容易产生非特异性产物。一般说来，用低浓度引物不仅经济，而且反应特异性也较好。一般终浓度用0.25-0.5pM/μl较好。
1 引物的分子量如何计算？比如：AAGCTTTTACCGC的分子量是多少？
2 OD值，1个OD值是不是等于40UG。
3 质量数，质量数的含义是什么，怎么计算？
4摩尔数（μmol）和终浓度(pM)和稀释水量（μl）
是不是计算稀释引物都要用到以上四点的各个参数？具体的公式是什么呢？
合成引物的单子上应该有算法：
1OD=33ug
1个碱基的分子量=324.5
（以上为近似值，通常都这样用）
1条引物的分子量=碱基数*324.5
质量数=OD*33ug
摩尔数=质量数/分子量
先离心的原因是什么？
因为引物合成后是干粉状的，在运输过程中可能会沾到管壁或管盖上，直接打开有些粉末可能会飘出去，引物的量就减少了。先离心使粉末都到管底，可以避免这种现象的发生。
然后根据以下公式可计算出所加双蒸水的量
33nmol/OD×管上所标OD值×100
是为10pmol/ul浓度的引物溶液,还可以由此推算其它浓度所需的双蒸水量。
可于－20度保存。
订引物回来的说明书背面一般都有引物稀释计算的说明的.
注意分装！