pgl3质粒sv40启动子什么作用

发布网友发布时间：2022-05-14 23:08

共1个回答

热心网友时间：2023-11-06 08:50

利用双荧光素酶报告系统探讨活化T细胞核因子（NFAT）能否*常见组成性启动子CMV,SV40和TK,为不同条件下选择合适双荧光报告系统内参提供依据。方法：用*性内切酶BglⅡ和HindⅢ分别从质粒pCDNA3.1和pRL-TK中切下CMV和TK启动子,克隆至pGL3-basic载体中,构建成pCMV-Luc和pTK-Luc载体。将构建pCMV-Luc和pTK-Luc以及商品化的pGL3-control（SV40启动子驱动）,分别与SV40（pBIND）和TK（pRL-TK）两种启动子驱动的两种内参质粒共转染入HEK293细胞;观察过表达组成性活化NFAT后相对荧光素酶活性读数的改变。结果：成功构建了pCMV-Luc和pTK-Luc质粒,荧光素酶活性检测发现,常见组成性启动子SV40启动子对过表达组成性活化的NFAT存在一定的反应。结论：T细胞活化过程中重要的转录因子NFAT能够*SV40启动子活性;表明常见组成性启动子SV40并非真正、绝对的组成性不变。因此,在荧光素酶报告系统内参选择时需要充分考虑该问题,本研究为合理选择内参质粒提供了一个可行策略。

荧光素酶报告基因检测

1、pRL-TK这个载体是由Promega开发的，pRL-TK是海肾荧光素酶报告载体，含有SV40增强子，质粒图谱如下所示：2、pGL3-Basic是萤火虫荧光报告载体，图谱如下图所示：从这两个图谱中可以发现，ppGL3-Basic这个载体主要是用于评估miRNA与靶基因3’UTR的结合，靶基因的3’UTR放在荧光素酶的后面，这个荧光素酶...

pcmv与pcmv ie启动子有何区别

利用双荧光素酶报告系统探讨活化T细胞核因子（NFAT）能否调控常见组成性启动子CMV,SV40和TK,为不同条件下选择合适双荧光报告系统内参提供依据。方法：用限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ分别从质粒pCDNA3.1和pRL-TK中切下CMV和TK启动子,克隆至pGL3-basic载体中,构建成pCMV-Luc和pTK-Luc载体。将构建pCMV-Luc和...

双荧光素酶笔记

从这两个图谱中可以发现,pMIR-REPORT miRNA这个载体主要是用于评估miRNA与靶基因3’UTR的结合,靶基因的3’UTR放在荧光素酶的后面,这个荧光素酶是荧火虫荧光素酶,而pRL-TK这个载体则表达海肾荧光素酶,将这两个质粒共同转染进入293细胞中来检测荧光时,pRL-TK这个质粒起到一个内参的作用。第二种方案就是将荧火...

报告基因的列举

（1）最常用的报告基因大多是编码抗生素抗性蛋白的基因，通过检查产物是否具有抗生素的抗性来确定基因的表达情况。（2）氯霉素乙酰基转移酶（CAT）：该报告基因来源于大肠杆菌转位子9，是第1个用于检测细胞内转录活性的报告基因。氯霉素乙酰基转移酶可催化乙酰CoA的乙酰基转移到氯霉素3羟基，而使氯霉素解毒。C...

质粒启动子与终止子作用机理质粒启动子终止子质粒启动子质粒最多有几个启动子质粒复制启动子的方向 SV40启动子 ptac启动子 cag启动子三启动子载体